伍文定,字时泰,湖北松滋人。臂力过人,擅长骑马、射箭,议论事情慷慨激昂。当初做常州推官,办事精明、勤快,很会断案,被称为强干的小吏。魏国公徐俌与百姓争抢田地,文定把田判给了百姓,刘瑾得到徐俌送的重礼后,就制造大案,巡抚艾朴以下十四个人都被逮捕了,文定已经升调为成都同知,也被抓进京城的大牢中,结果被罢官为民。刘瑾败亡以后,他重新起用到嘉兴做官。
江西姚源的盗贼王浩八等,流窜到浙江开化抢劫,都御史俞谏传令让文定与参将李隆、都指挥江洪、佥事储珊一起讨伐他,驻军华埠。而都指挥白弘与湖州知府黄衷另外在马金扎营,盗贼刘昌三攻破营寨,活捉了白弘,官军受到了很大打击。浩八攻打华埠,江洪、文定打败了他,追到孔埠,李隆、储珊也追到池淮,破坏了敌人的巢穴,接着又进攻淫田。江洪率奇兵深入敌区,中了盗贼的奸计,与指挥张琳等都被俘。文定等将因为殿后得以生还,盗贼也就此逃回江西去了,俞谏等把文定忠于职责、勇敢作战的事迹上报朝廷后,朝廷诏令主管部门对他加以奖励。后来他升任河南知府,设计擒获了大盗张勇、李文简,因为才干优裕,能干大事,所以调往吉安。期间又定计平定了永丰和大茅山的盗贼,后来,又帮助巡抚王守仁平定了桶冈、横水。
宸濠叛乱发生后,吉安的百姓、士绅们争先恐后地逃跑或躲藏,文定把逃亡的斩了一个,群众才安静下来。然后他把守仁迎入城中,知府刑王旬、徐琏、戴德孺等先后到来,一起讨伐宸濠,由文定当大将。文定亲身冒着箭头和滚石的威胁向前,大火烧着胡须也不退后一步,宸濠之乱被平定,他战功最大,被提升为江西按察使,张忠、许泰到南昌,想顶他的战功,而守仁已经拿获宸濠带到浙江去了,张忠等失望后非常恼恨,文定出来拜见,就把他给绑了,文定骂道“:我不顾诛杀九族为国家平定反贼,有什么罪?你们是天子的心腹,侮辱国家的忠臣义士,为反贼报仇,依法该斩了你们。”张忠更加恼火了,就把文定棰倒在地上,文定后来上书皇帝请求解职,武宗没有回答他。